核酸外切酶III

简要描述：核酸外切酶III能作用于双链DNA，沿3’→5’方向逐步切去单核苷酸。与底物的每次结合，只切除Z末的几个核苷酸，从而对双链DNA产生渐进缺失。Z适底物是平末端或3’凹陷末端DNA，亦可作用于双链DNA的切割产生单链gap，对于对单链DNA无活性。3’突出末端抗该酶的切割，拮抗程度随3’突出末端的长度而改变，四碱基或更长的突出*不能被切割。

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更新时间：2023-07-20
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核酸外切酶III说明
核酸外切酶III能作用于双链DNA，沿3’→5’方向逐步切去单核苷酸。与底物的每次结合，只切除zui末的几个核苷酸，从而对双链DNA产生渐进缺失。zui适底物是平末端或3’凹陷末端DNA，亦可作用于双链DNA的切刻产生单链gap，对于对单链DNA无活性。3’突出末端抗该酶的切割，拮抗程度随3’突出末端的长度而改变，四碱基或更长的突出*不能被切割。这种特性对于一端是抗性位点（3’突出端）一端是敏感位点（平端或5’突出端）的线性DNA分子，可以产生单向缺失。例如，可将双链DNA用产生不同末端的限制性内切酶双酶切后，利用Exonuclease III的3′→5′的外切酶活性，从一端降解，得到互补的单链DNA和5′-P单核苷酸。与BAL 31 Nuclease相比，本酶的碱基特异性较小，如在富含GC的位置上，由于反应停止的机率较低，可用于DNA的Deletion制作。
本是把exonuclease III基因( E. coli)在大肠杆菌中进行表达后，经多次纯化分离而得到的。

· 质量保证
本经多次柱纯化，SDS-PAGE胶检测仅可见清晰单一的目的条带；PCR方法检测无大肠杆菌DNA残留，无核酸内、外切酶污染。

· 使用建议
不能切割硫代磷酸的桥连。因此，也可以通过引入一个硫代磷酸核苷酸将DNA分子的一端位点保护起来，再创建单向缺失。