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细胞系鉴定错误的根源
发布时间:2017-10-27   点击次数:322次
   细胞系鉴定错误的根源
  大部分的细胞系在学术环境中被建立,在学术环境下,组织培养通常被认为是一种对技能少有要求的技术,其所用到的必要设备如流动柜和孵育箱使用起来没什么限制。在这些情况下,尝试建立一种新的细胞系通常会导致交叉污染是不足为怪的。在送至德国的微生物和细胞培养收藏所的550个个白血病和淋巴瘤细胞系中,59/395(15%)被初创者送来的细胞系以及23/155(15%)的二级来源是错误的。可以推测大部分二级来源的细胞系已被交叉污染或被初创者错误鉴定。
  有许多缘由可以引起细胞培养物错误鉴定,每一个实验室都存在风险。或许细胞错误鉴定zui直接的原因就是在常规操作过程中对细胞培养容器进行了错误标记。造成这种问题出现的原因有:实验员的工作负荷、缺乏注意以及在细胞操作过程中的分心。
  培养物的交叉污染以及随后污染细胞的过量生长是另一个引起细胞系错误鉴定的常见原因。这种情况发生的几率在以下条件会增加:试剂的共用、在再喂养操作时反复使用相同的试管、在没有充分分离每一细胞类型情况下同时对多个培养物进行操作。当交叉污染发生时,一种细胞类型迅速生长而超过另一种,在4-5次细胞传代后,一个纯的污染细胞培养物将会形成。
  在使用其它物种的滋养层(例如小鼠3T3细胞)来繁殖人类干细胞或原始细胞时有意地共培养会导致交叉污染或人类细胞系过生长。正常情况下,滋养层细胞处于无增殖状态,但只要生长抑制程序不完全,它就会不断繁殖并逐步取代人类细胞。体细胞杂交虽不常见但也会发生,如人类套细胞淋巴瘤细胞系NCEB-1就携带了小鼠的七条染色体。
  异种移植也会导致细胞系交叉污染和错误鉴定,来自异种移植的复苏细胞会被宿主动物细胞所替代。
  一般而言,交叉污染zui终的结果将会是少量适应细胞完全且快速的替代。两个细胞系不能持续共存于同一个培养环境,除非它们是共生关系,但这种情况据我们所知还未有报道。一个细胞群经过许多次传代后还能包含一个稳定的混合基因组,*已知的情况是接续的体细胞杂交。
  简单、经济的质控措施能够阻止或至少会减少细胞错误鉴定的发生。由于缺乏重视及未采用质控措施导致细胞错误鉴定现象极其普遍。大量质控措施的实行以及相应文件的适当调整被认为是生物制药领域出现相对较低细胞错误鉴定报道的因素。

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