你对荧光定量PCR了解了多少

 　　提到PCR，相信在实验室待过的同学并不会很陌生，这个由美国科学家Mullis在1985年发明的聚合酶链反应，至今在世界范围内都有广泛的应用，作为生物学实验的一个重要的方法，其有着不可估量的作用。
　　什么是荧光定量PCR
　　我们知道，DNA有着双螺旋结构，当温度达到95摄氏度时，双链的DNA会分解成为单链状态，而在温度到达72摄氏度左右时，DNA聚合酶会沿着磷酸到五碳糖的方向进行合成。聚合酶链反应PCR就是通过不断地调节温度，以数量级的速度增加DNA数量的方法。
　　而实时荧光定量PCR是指，在PCR反应体系中加入荧光基团，利用荧光信号的变化实时监测PCR扩增反应中每一个循环扩增产物量的变化，通过Ct值和标准曲线的关系对起始模板进行定量分析。
　　实时荧光定量常用的荧光化学分类有染料法和探针法。其中，探针法可以更加地对需要检测的DNA片段进行染色，一般情况下，探针法的特异性更高。
　　荧光定量PCR的价值
　　事实上，大多数病毒在感染动物以后，会在感染后的7天左右产生特异性抗体。此后，当同种病毒再次入侵时，机体会迅速的产生高水平抗体，以中和这些病毒。这个过程被称为机体的特异性免疫反应。
　　依照生物体的这个特点，一般情况下，科学家会采用PCR或酶标进行实验检测。但也有意外，比如目前国内较为流行且对养猪业造成惨重损失的“非洲猪瘟病毒”，该病毒的自然宿主只有家猪，野猪，钝缘软蜱，但除猪只本身之外，人、车、物、料、等环境中携带有非洲猪瘟病毒都会造成非洲猪瘟的传播，进而威胁到猪群的安危。
　　更为可怕的是，这种病毒侵入猪只体内后，猪只在产生抗体之前就会走向死亡，死亡率高达90%~100%，自2018年非洲猪瘟进入中国以来，将近一年时间，对我国畜牧业造成了上百亿的损失。此时，由于酶标法检测的是动物产生抗体后的感染情况，显然，对待这种烈性病毒来言，其价值远远低于荧光定量PCR。
　　荧光定量PCR有着高灵敏性、高度、方便省时等特点，他可以在短时间内，将一个微量的特种DNA扩增到一个足以监测到的数量级。由于在体内达到一定数量级会造成生物体死亡，这相当于是在和动物体内的病毒赛跑，以达早发现，早处理的效果。