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培养基是微生物试验的基础
发布时间:2020-10-14   点击次数:270次
  培养基是微生物试验的基础,直接影响微生物试验结果.适宜的培养基制备方法,贮藏条件和质量控制试验是提供优质培养基的保证.
  培养基的制备
  微生物实验室使用的培养基可按处方配制,也可使用按处方生产的符合规定的脱水培养基.
  在制备时,应选择质量符合要求的脱水培养基或按单独配方组分进行配制.(应附有处方和使用说明,配制时应按使用说明上的要求操作以确保质量符合要求,结块或颜色发生改变的脱水培养基不得使用.)
  脱水培养基或单独配方组分应在适当的条件下贮藏,如低温,干燥和避光,所用的容器应密封,尤其是盛放的容器.商品化的成品培养基除了应附有处方和使用说明外,还应注明有效期,贮藏条件,适用性检査试验的质控菌和用途.为保证质量的稳定可靠,各脱水培养基或各配方组分应准确称量,并要求有一定的精确度.
  配制常用的溶剂是纯化水.应记录各称量物的重量和水的使用量.
  配制所用容器不得影响培养基质量,一般为玻璃容器.配制所用的容器和配套器具应洁净,可用纯化水冲洗以消除清洁剂和外来物质的残留.对热敏感的培养基如糖发酵培养基其分装容器一般应预先进行灭菌,保证无菌性.
  脱水培养基应完全溶解于水中,再行分装与灭菌.配制时若需要加热助溶,应注意不要过度加热,避免培养基颜色变深.如需要添加其他组分时,加人后应充分混勻.培养基灭菌应按照生产商提供或使用者验证的参数进行.商品化的成品培养基必须附有所用灭菌方法的资料.
  灭菌一般采用湿热灭菌技术,特殊培养基可采用薄膜过滤除菌.
  培养基若采用不适当的加热和灭菌条件,有可能引起颜色变化,透明度降低,琼脂凝固力或pH值的改变.因此,培养基应采用验证的灭菌程序灭菌,灭菌方法和条件,应通过无菌性试验和促生长试验进行验证.此外,对髙压灭菌器的蒸汽循环系统也要加以验证,以保证在一定装载方式下的正常热分布.温度缓慢上升的高压灭菌器可能导致培养基的过热,过度灭菌可能会破坏绝大多数的细菌和真菌培养基促生长的质量.灭菌器中培养基的容积和装载方式也将影响加热的速度.因此,应根据灭菌培养基的特性,进行全面的灭菌程序验证.应确定每批培养基灭菌后的pH值(冷却至室温25℃测定).如果处方中未列出pH值的范围,除非经验证表明培养基的PH值允许的变化范围很宽,否则,pH值的范围不能超过规定值±0.2.
  制成平板或分装于试管的培养基应进行下列检查:容器和盖子不得破裂,装量应相同,尽量避免形成气泡,固体培养基表面不得产生裂缝或涟漪,在冷藏温度下不得形成结晶,不得污染微生物等.应检查和记录批数量,有效期及无菌检查.

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