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细胞养不好?这些注意事项请收好
发布时间:2020-11-23   点击次数:190次
  细胞养不好?这些注意事项请收好
  1、购买的细胞死亡或存活率不佳可能原因?细胞冷冻管解冻后,为何会有细胞数目太少的情形?
  研究人员在细胞培养时出现存活率不佳,常见原因可归纳为:培养基使用错误或培养基品质不佳;血清使用错误或血清的品质不佳;解冻过程错误;冷冻细胞解冻后,加以洗涤细胞和离心;悬浮细胞误认为死细胞;培养温度使用错误;细胞置于–80℃太久。
  研究人员在冷冻细胞培养时出现细胞数目太少,大都是因为离心过程操作上的失误,造成细胞的物理性损伤,以及细胞流失。建议细胞解冻后不要立刻离心,应待细胞生长隔夜后再更换培养基即可。
  2、收到的冷冻管瓶身破裂,瓶盖有裂纹,或瓶盖脱落的原因?
  冷冻管瓶盖裂纹,或瓶身破裂,可能是因为操作者夹取冷冻管时用力不当,造成冷冻管裂损,建议使用止血钳小心夹取。另冷冻管瓶盖松动或松脱,是因热胀冷缩的物理现象,冷冻管有可能因此而造成细胞污染,故冷冻管于放入和取出液氮桶时,均应立刻将冷冻管再一次扭紧。
  3、如何选用特殊细胞系培养基?
  培养某一类型细胞没有固定的培养条件。在MEM中培养的细胞,很可能在DMEM或M199中同样很容易生长。总之,优选MEM做粘附细胞培养,RPMI-1640做悬浮细胞培养是一个好的开始,各种目的无血清培养*好优选AIMV(12005)培养基(SFM)。
  4、L-谷氨酰胺在细胞培养中重要吗?它在溶液中不稳定吗?
  L-谷氨酰胺在细胞培养时是重要的。脱掉氨基后,L-谷氨酰胺可作为培养细胞的能量来源、参与蛋白质的合成和核酸代谢。L-谷氨酰胺在溶液中经过一段时间后会降解,但是确切的降解率一直没有*终定论。L-谷氨酰胺的降解导致氨的形成,而氨对于一些细胞具有毒性。

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