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血清沉淀会影响细胞培养吗?怎么避免沉淀

  • 发布日期:2021-12-15      浏览次数:730
    •   血清沉淀会影响细胞培养吗?
        1.细胞生长
        我们在出厂前都会对血清进行一系列质检测试,确保血清质量达到严格标准。血清测试和细胞培养经验也表明,其沉淀成分不会影响血清作为细胞培养添加物的表现。这一点得到了众多客户和其他血清供应商的肯定。解冻之后,血清中纤维蛋白原往往会发生凝集,形成肉眼可见的沉淀。
        2.怀疑污染
        磷酸钙颗粒经常会被当成微生物污染而引发不必要的担忧。一般情况下,当操作人员融化血清后注意到有雾状浑浊时,常将其存放在4℃冰箱中观察,并考虑接下来是否继续使用。但这样会使沉淀进一步增多,反而会使血清更加浑浊,进而误以为存在血清污染。并且,在倒置显微镜下,可在血清中观察到四处游动的小黑点(磷酸钙颗粒的布朗运动),更容易使人误以为存在微生物污染。
        为防止这类误解的产生,我们不建议客户培养血清来验证是否存在污染,而是将血清直接接种在细菌培养基上进行培养,以观察是否有细菌的增殖。并且,进行革兰氏染色,并在油镜(100X10倍)下观察可直接确认是否存在微生物污染。
        怎样操作可以尽量避免沉淀出现?
        1.正确解冻
        首先,应按照逐步解冻的方式正确解冻血清:从-20℃取出后,置于4℃冰箱缓慢解冻,最后置于室温完成解冻。如果直接从-20℃拿到室温或37℃水浴解冻,则非常容易产生沉淀。在解冻过程中,请注意时不时缓慢摇晃瓶子,减少沉淀的产生。为避免反复冻融,建议您将血清分装使用。
        2.使用和保存注意事项
        血清沉淀很难预测和避免,出现沉淀后也无需担忧,这并不会影响血清的品质。已知血清沉淀在以下条件下会有增多的可能:
        1)热灭活;
        2)37℃培养;
        3)反复冻融;
        4)伽马射线照射;
        5)2-8℃长期保存;
        6)长期保存于可自动化霜的冰箱中(温度不稳定)。
        血清沉淀的形成机理多种多样,具体的机理尚不十分明确。我们尚不能准确预测和控制血清沉淀的产生。目前市面上所有品牌的血清产品都存在沉淀现象,这一点可以在各品牌*网站上关于沉淀问题的声明上得到证实。