荧光定量PCR技术简介

定量PCR简介

    荧光定量PCR技术是普通PCR技术的改良和发展，它提高了普通PCR技术的特异性和准确性，能做到实时监控和准确定量，广泛应用于基础研究、临床检验、海关检疫等各个领域。

 

定量PCR服务内容

1、 合成

设计合成各种标记探针并可根据客户要求负责探针的调试（详见合成）

2、 检测

mRNA表达检测及mRNA表达谱芯片后期验证

MicroRNA检测及MicroRNA表达谱芯片后期验证

SNP检测

基因copy数检测

病原微生物样品检测

3、 研发

接受采用荧光定量PCR的检测方法针对各种检测目标的合作研发和委托研发。

 

定量PCR实验流程

PCR引物探针设计合成调试

标准品制作

样本核酸抽提反转录

扩增检测

数据汇总初步分析

 

定量PCR检测周期

常规检测任务2－3周内完成，具体情况根据要检测的基因和样本数而定。

 

定量PCR客户提供

详细的实验要求，基因名称等（详见服务申请单），提供待测样本，保证样本质量。

 

定量PCR送样要求

细胞（≥10 5 个）                                                 

组织（≥100mg，黄豆大小）

全血（≥0.5ml）                                                     

基因组DNA（≥5ug）

 

报定量PCR告内容

提供电泳图片、荧光扩增曲线、标准曲线、原始报告等。

 

定量PCR应用领域

1、基础研究

a 基因表达分析

研究目标基因（mRNA和micrRNA）的表达状况，准确地进行定量分析。

B 基因型分析

针对相应的的等位基因或SNP位点，设计特异性的探针进行扩增检测。

2、临床病原微生物检测（科研分析）

对临床科研样品中的细菌、病毒等病源微生物做定性定量分析。

对进出口要检疫的病源微生物、寄生虫做定性定量分析。

 

电泳图谱



标准曲线



扩增曲线



溶解曲线