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MTT检测技术服务

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简要描述:

四甲基偶氮唑盐比色法(MTT方法),是通过快速简便的颜色反应来检测细胞存活数量。其原理是MTT可作为哺乳类动物细胞线粒体中琥珀酸脱氢酶的底物。当有活细胞存在时,线粒体内琥珀酸脱氢酶可将淡黄色的MTT还原成蓝紫色的针状甲月替(Formazan)结晶并沉积在细胞中,结晶物能被二甲基亚砜 (DMSO)溶解,用酶联免疫检测仪在570nm波长处测定其吸光度OD值,OD值的高低可间接反映活细胞的数量及其活性。

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MTT细胞活性检测服务

四甲基偶氮唑盐比色法(MTT方法),是通过快速简便的颜色反应来检测细胞存活数量。其原理是MTT可作为哺乳类动物细胞线粒体中琥珀酸脱氢酶的底物。当有活细胞存在时,线粒体内琥珀酸脱氢酶可将淡黄色的MTT还原成蓝紫色的针状甲月替(Formazan)结晶并沉积在细胞中,结晶物能被二甲基亚砜 (DMSO)溶解,用酶联免疫检测仪在570nm波长处测定其吸光度OD值,OD值的高低可间接反映活细胞的数量及其活性。

MTT法常用的研究:

1、检测细胞活性:常作为细胞毒性试验的一种方法。

2、体外药物敏感实验:该方法简便、经济、快速,重复性好,所需的细胞数较少,没有放射性,目前广泛的用于临床前的抗癌药物的筛选研究。

3、一些细胞因子活性的研究

实验步骤:

1)将对数生长期细胞用胰酶消化后配制成浓度为1-10×104个/ml的细胞悬液,按1000-10000个细胞/孔接种于96孔板,每孔加100μl。

2)将平板置37℃、 5%CO2湿度培养箱中24小时后,加入含有不同浓度受试样本的培养液100μl,每个样本不同浓度设平行的三个孔,对照组加不含样本的培养液100μl,再放入培养箱中孵育24-72 小时,

3)用快速翻板法倒掉培养液,每孔加入用无血清1640按5mg/ml新鲜配制的MTT溶液100μl,温育4小时,使MTT还原为甲 月替,再次倒掉上清液,每孔加DMSO(二甲基亚枫)200μl,用平板摇床摇匀后,使用酶标仪测定光密度值(OD)(参考波长450nm,检测波长570nm),以溶剂对照处理细胞为对照组,按下述公式计算化合物对细胞的抑制率,并按中效方程计算半数抑制浓度IC50:

客户方需提供:

样本描述,相关的实验设计内容如作用时间和样本浓度等。

公司方提供:

实验结果IC50值。

实验周期与费用:

实验费用以样本数和细胞株的种类数目为单位计算,实验周期为18个工作日,公司将在材料和预付的实验经费全部到位后25个工作日之内提交实验结果。客户需在收到实验结果后一周内付清所有剩余款项。

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