产品中心您的位置:网站首页 > 产品中心 > 分子生物学技术服务 > DNA抽提和纯化 > 基因组DNA抽提
基因组DNA抽提

基因组DNA抽提

简要描述:

基因组DNA抽提,可以抽提动物组织、鼠尾、培养细胞、细菌、酵母、动物血液、昆虫以及固定组织的包括基因组DNA在内的总DNA。通过试剂盒说明书中提供的不同操作方法,几乎可以抽提所有样品中的总DNA。

浏览量:643

更新时间:2017-02-28

基因组DNA抽提:

    通过基因组DNA抽提试剂盒可以抽提动物组织、鼠尾、培养细胞、细菌、酵母、动物血液、昆虫以及固定组织的包括基因组DNA在内的总DNA。通过试剂盒说明书中提供的不同操作方法,可以抽提除植物样品外的几乎所有样品中的总DNA。

步骤:
    样品首先被蛋白酶K消化,随后加入适合DNA结合到纯化柱上的缓冲液,然后加入到纯化柱内。通过高速离心,使DNA在穿过纯化柱的瞬间,结合到纯化柱上,随后通过两次洗涤去除各种杂质,zui后通过洗脱液把DNA洗脱下来。整个过程无需酚氯仿抽提,无需酒精沉淀,样品裂解后仅需约15分钟即可完成。

效率:
   1. 通过试剂盒纯化得到的基因组DNA的长度zui长可达50kb左右,平均为30kb左右,zui短为100bp的DNA也可以被纯化。如需获得更长的基因组DNA,对于哺乳动物样品,包括组织或细胞等,可以使用特定的试剂盒抽提。
    2.通过试剂盒获得的总DNA,OD260/OD280的范围通常在1.7至1.9之间。
    3.试剂盒可以抽提少至数百个细胞,多至25mg组织、0.5-1cm鼠尾、500万个培养细胞、20亿个细菌或5000万个酵母。

     4.样品用量过多,反而会影响抽提效果。如果待抽提样品的DNA含量小于5ng,建议加入适当量的carrier DNA,例如poly-dT或其它对后续实验没有干扰的DNA,也可以加入适当量的carrier RNA,例如yeast RNA等,以改善抽提效果。
    5.试剂盒的标准操作步骤抽提得到的总DNA会含有少量RNA,但如果按照一般的试剂盒可选步骤加入RNase A,就可以获得不含RNA的高纯度总DNA。含有RNA的总DNA可以用于PCR,但对于某些其它的后续反应可能会产生一些影响。


 DNA抽提时样本抽提的范围:  

    纯化柱对于DNA的zui大容量约为30微克。通常每200万Hela细胞或500万淋巴细胞可以抽提得到15-25微克总DNA,每25mg肝、脑、肾组织可以抽提得到10-30微克总DNA,每25毫克心、肺组织可以抽提得到5-10微克总DNA,每10mg脾组织可以抽提得到5-30微克总DNA,每1.2cm小鼠尾尖或0.3cm大鼠尾尖可以获得10-25微克总DNA。
    
DNA抽提小量试剂盒包装清单:

产品编号

产品名称

包装

D-1

样品裂解液A

10ml

D-2

样品裂解液B

11ml

D-3

洗涤液I

21ml (*次使用前加入7ml无水乙醇)

D-4

洗涤液II

16ml (*次使用前加入24ml无水乙醇)

D-5

洗脱液

22ml

D-6

蛋白酶K

1.1ml

DNA纯化柱

50个

废液收集管

50个

说明书

1份

保存条件:
    蛋白酶K-20℃保存,其余均室温保存。一年有效。蛋白酶K室温(15-25℃)存放一周,活力无明显下降。


DNA抽提注意事项:
    1.抽提细菌、酵母样品时还需要一些特定的试剂,详情请参考相关实验步骤。
    2.如需制备不含RNA的高纯度总DNA,需自备RNase A。
    3.温度较低时样品裂解液A或样品裂解液B中可能会有沉淀产生,属正常现象。使用前必须检查一遍。如有沉淀,55℃水浴孵育使沉淀溶解,混匀后使用。
   4.*次使用前洗涤液I需添加7ml无水乙醇,洗涤液II需添加24ml无水乙醇,混匀,并在瓶上做好标记。
    5.试剂盒需使用55℃水浴,请提前作好准备。
    6.除特别说明外,每次Vortex应控制在5-10秒左右。
    7.试剂盒所有操作均在室温进行,操作时无需冰浴。所有离心也均在室温进行。
    8.废液收集管在一次抽提中需多次使用,切勿中途丢弃。
    9.参考使用说明,从某些样品中抽提总DNA不需要使用样品裂解液A。 
    10.为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。 

上一篇 : MTT检测技术服务    下一篇 :  质粒DNA抽提
COPYRIGHT @ 2016 上海基屹生物科技有限公司    网站地图    沪ICP备14013097号-1    关于我们 新闻中心 产品中心 联系我们
为您提供优质的基因组DNA抽提,欢迎来电咨询基因组DNA抽提更多信息

座机:
021-5413 5696
手机:
18516235431、13636417775
联系人:盛经理
点击这里给我发消息
点击这里给我发消息