质粒DNA抽提

质粒DNA抽提:

    通常是指从大肠杆菌中进行小量质粒的快速抽提的方法，通过试剂盒采用新型的离子交换柱，在特定条件下，使质粒能在离心过柱的瞬间，结合到质粒纯化柱上，在一定条件下又能将质粒充分洗脱，从而实现质粒的快速纯化。无需酚氯仿抽提，无需酒精沉淀，12个样品只需不足30分钟即可完成。

质粒DNA抽提效率:
    1.每个质粒纯化柱可以结合的质粒量的上限约为20微克。

    2.每个纯化柱可用于抽提1-5毫升用LB培养的大肠杆菌。

    3.抽提所得质粒的OD值一般在1.80左右。

    4.抽提获得的质粒量会受质粒拷贝数等因素影响。

    5.抽提获得的质粒DNA的OD值也会因菌种不同等原因而略有波动。

用途：
   质粒可直接用于转染细胞，DNA测序，PCR，基于PCR的突变，体外转录，转化细菌，内切酶消化等。

所需试剂：溶液I（悬浮液），溶液II（裂解液），溶液III（结合液），溶液IV（洗涤液），溶液V（洗脱液），RNase A（100mg/ml），质粒纯化柱，废液收集管等

保存条件：
    室温保存，一年有效。

注意事项： 
    1.*次使用前把试剂盒提供的RNase A全部加到溶液I（悬浮液）中，混匀，并在瓶上做好标记。加入RNase A后4℃存放。
    2.*次使用前在每瓶溶液IV（洗涤液）中加入54ml无水乙醇，混匀，并在瓶上做好标记。
    3.温度较低时，溶液II和溶液III可能会有沉淀产生。使用前必须检查一遍。如有沉淀，37℃水浴加热溶解，混匀后使用。溶液II请勿过分剧烈混匀，否则会产生大量气泡。
    4.溶液II使用完后，一定要盖紧瓶盖，防止被空气中二氧化碳酸化。
    5.溶液II有强碱性，溶液II和溶液III对人体都有刺激性，操作时请小心，并注意适当防护。
    6.所有操作均在室温进行，操作时无需冰浴。所有离心也均在室温进行。
    7.废液收集管在一次抽提中需多次使用，切勿中途丢弃。
    8.为了安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。