您现在的位置:首页 > 技术文章 > miRNA定量检测行业热度不减

miRNA定量检测行业热度不减

  • 发布日期:2017-09-26      浏览次数:969
    •    miRNA检测行业热度不减
        MicroRNAs (miRNAs)是一种存在于真核生物的内源性非编码小RNA,具有抑制靶向mRNA转录、翻译或者剪切靶向mRNA并促使其降解的功能。它会组装进入沉默复合体(RISC),识别并与靶向mRNA互补配对,从而降解或者阻止mRNA翻译。
        miRNAs负责调控多种生理过程,包括细胞周期(发育、迁移和凋亡)、干细胞分化、免疫调节、代谢控制、神经发育、病毒复制等等。这意味着,它与多种疾病有关联。miRNAs存在于许多常用组织样本中,包括血浆、血清、唾液以及尿液,且高度稳定,可以作为生物标记物用于多种疾病的诊断,例如癌症、神经性衰退疾病、心血管疾病和自身免疫性疾病。
        此外,相比于其他生物分子,miRNAs更具有组织特异性,且能够穿过血脑屏障,从而可以成为检测大脑健康的生物标记物,用于检测多种神经类疾病,包括多发性硬化症、阿尔兹海默症和帕金森症。
        基于上述优势,科研机构以及医药企业开始转向开发基于miRNAs的检测技术和服务项目,它们能够为疾病诊断、防治提供更快捷的过程和手段。而且,这些优势将会推动生命科学领域对miRNAs检测的需求。Kalorama Information公司调研报告指出,2015年miRNAs检测及服务市场价值约达到4.07亿美元。而且,根据GEN报道,基于miRNAs的检测技术和服务至少在未来5年内都将是一个热门领域。
        miRNAs检测技术
        目前,miRNAs检测技术主要包括qRT-PCR、微阵列(microarray)、高通量测序技术(NGS)
        首先,定量即时聚合酶链锁反应(qRT-PCR)能够借助荧光染剂测量每次PCR循环后扩增的核酸总量。但是它在灵敏度、重复性等方面存在局限性。
        而微阵列则是实现基因表达信息快速检测的重要技术,具有易于操作、成本较低、准确率提高等优点,适用于大规模miRNAs检测。但是它依然在灵敏度上有所欠缺,不能挖掘未知的miRNAs。但是,仍然有不少企业正在开发miRNAs微阵列检测技术,包括Affymetrix、Agilent、Thermo Fisher 和Illumina等等。
        随着测序技术、仪器、成本的更新优化,高通量测序技术也逐渐成为量化分析miRNAs的热门手段。包括Illumina的 MiSeq、Thermo的Ion Personal Genome Analyzer以及Ion S5 在内的测序平台让miRNAs大样本分析变得更易实现。
        NGS的优势在于测序通量大、灵敏度高、重复性好,且能够检测未知基因,提供定量定性分析等等。但是,它在miRNAs分析应用上依然存在缺陷,例如样本制备标准高、定量准确性不高、成本相对较高、复杂性增强以及仪器、试剂、数据分析软件涉及不同的供应商增加了工作流程的繁琐性。特别是,针对miRNAs分析的样本制备需要遵循特定的步骤,以减少引物二聚体的形成。
        miRNAs功能研究
        “miRNA Mimics”、“miRNA inhibitor”是研究miRNAs功能的典型“工具包”。
        其中,“miRNA Mimics”是一种通过化学修饰寡核苷酸的方法合成而来的能够模拟生物内源miRNAs的小RNA分子。它会进一步增强内源性miRNA的沉默功能,从而降低蛋白质表达,进行功能获得性(gain-of-function)研究。
        而“miRNA inhibitor”同样也是化学合成而来,它可以特异地靶向和敲除单个miRNA分子,从而削弱内源miRNA的基因沉默效应,提高蛋白表达量,进行功能缺失性(loss-of-function)研究。
        Mimics 和inhibitors实验可以同时进行验证miRNA的生物学功能。目前,包括Thermo、Dharmacon、Exiqon、Integrated DNA Technologies、Qiagen、MilliporeSigma在内的多家公司都在开发、生产miRNA功能验证试剂盒。
        miRNA检测技术和服务市场分析
        随着基础研究的深入、应用技术的创新、临床转化的推广,miRNA分析及服务依然是一个充满活力和前景的行业。众多生物科技公司在该领域布局,承担着不同产品的开发和生产,包括miRNA特定qRT-PCR 试剂、微阵列、生物标记试剂、NGS文库构建盒、功能验证试剂盒等。
        该领域的领头*包括Thermo Fisher、Exiqon、Dharmacon、Qiagen、Illumina。市场竞争力主要依赖于产品的质量和性能,所以产品或者技术是否能够满足科研、临床应用至关重要。