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CCK-8试剂盒的检测步骤及使用注意事项介绍

  • 发布日期:2023-02-07      浏览次数:578
    •   CCK-8试剂盒的检测步骤及使用注意事项介绍 
        CCK-8试剂盒利用了同仁化学研究所(Dojindo)开发的四唑盐——WST-8(2-(2-甲氧基-4-硝苯基)-3-(4-硝苯基)-5-(2,4-二磺基苯)-2H-四唑单钠盐),它在电子载体1-MethoxyPMS存在的情况下能够被还原成水溶性的甲臜染料。
        CCK-8试剂盒的检测步骤:
        1、向各孔中加入100μl细胞悬液。
        2、在37℃下预孵育培养板。
        3、向各孔中加入各浓度的待测溶液10μl。
        4、37℃下孵育。
        5、向各孔中加入10μl的CCK-8溶液。
        6、37℃下孵育1-4小时。
        7、测定450nm处的OD值。
        CCK-8试剂盒的使用注意事项:
        (1)使用适当的培养基制备50,000-100,000个/ml的细胞悬液。
        (2)建议使用CO2培养箱过夜预培养。
        (3)使用培养基或PBS来制备溶液。
        (4)如果待测溶液有还原性,测定不含细胞,但含有CCK-8的待测溶液在450nm处的空白吸光度。如果该吸光度很小,则可以直接加入CCK-8,如果吸光度相对较大,则需要除去培养基,并用培养基洗涤细胞两次,然后加入新的100μl培养基和10μlCCK-8进行检测。
        (5)白细胞可能需要培养较长时间。