浅析慢病毒包装的主要流程

 　　慢病毒属是反转录病毒科下的一个属，包括8种能够感染人和脊椎动物的病毒，原发感染的细胞以淋巴细胞和巨噬细胞为主，感染个体zui终发病，慢病毒感染的显著特点是感染个体在出现典型的临床症状之前，大多经历长达数年的潜伏期，之后缓慢发病，因此这些病原体被称为慢病毒，例如：人类免疫缺陷病毒(HⅣ）、猴免疫缺陷病毒(SⅣ）、马传染性贫血(EIA）、猫免疫缺陷病毒(FⅣ）等等。
　　慢病毒包装的主要流程：
　　1、慢病毒载体的构建：根据不同的研究需求构建慢病毒载体，如用于RNAi的慢病毒载体、用于基因过表达的慢病毒载体、用于启动子活性研究的慢病毒载体等；
　　2、慢病毒包装过程：将重组病毒质粒及其辅助包装质粒共转染至包装细胞中，收集富含慢病毒颗粒的细胞上清液，对其浓缩后得到高滴度的慢病毒浓缩液，在293T细胞中测定并标定病毒滴度。
　　慢病毒包装的注意事项：
　　1、在慢病毒感染细胞前，为检测病毒上清培养液内病毒的活性，并确定病毒与转染细胞之间的比率，需要确定病毒的滴度。病毒的滴度可以通过转染Hela细胞，然后使用抗体筛选稳定的细胞转染株，进行计数和数值统计。
　　2、在慢病毒转染细胞的过程中zui重要的一步是融合，只有一些较小的慢病毒载体才能转导进细胞，因此，病毒颗粒的吸附是慢病毒转染的限速步骤。
　　本公司提供专业的慢病毒包装服务，如果您有需要，敬请来电！