CRISPR-Cas9核酸酶技术,通过体外转录,获得编码Cas9酶与SgRNA,然后通过受精卵显微注射,获得基因敲除小鼠模型, 为快速制备基因敲除小鼠开辟了新的技术途径。
基屹生物可以根据客户的需求设计高效特异的3-5条Guide RNA,并通过细胞实验筛选的序列,保证成功率。整个实验流程仅需3-5个月。
利用CRISPR-Cas9技术制备基因打靶小鼠的原理图:
在没有外加供体模板DNA的情况下,细胞在CRISPR-Cas9剪切目的基因后,通过NHEJ途径产生移码突变,从而获得基因敲除小鼠;在外加供体模板DNA后,细胞在CRISPR-Cas9剪切目的基因后,通过HDR途径将外源DNA序列引入到基因组中,从而获得基因敲入小鼠或条件型基因敲除小鼠。
服务流程与周期:(3-5个月)