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荧光定量PCR技术服务

荧光定量PCR技术服务

简要描述:

荧光定量PCR技术服务技术于1996年由美国Applied Biosystems公司推出,由于该技术不仅实现了PCR从定性到定量的飞跃,而且与常规PCR相比,它具有特异性更强、有效解决PCR污染问题、自动化程度高等特点,目前已得到广泛应用。

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荧光定量PCR技术服务SYBR Green特性:

(1)只有和双链DNA结合后才发荧光。

(2)变性时,DNA双链分开,无荧光。

(3)在延伸结束阶段采集荧光信号。

(4)SYBR Green也能和非特异性的双链DNA结合发光,所以必须在反应结束时做熔解曲线分析。 

荧光定量PCR技术服务PCR技术于1996年由美国Applied Biosystems公司推出,由于该技术不仅实现了PCR从定性到定量的飞跃,而且与常规PCR相比,它具有特异性更强、有效解决PCR污染问题、自动化程度高等特点,目前已得到广泛应用。 

TaqMan探针的特性:

(1)5′端标记有报告基团(Reporter, R),如FAM、VIC等 

(2)3′端标记有荧光淬灭基团 (Quencher, Q)

(3)探针完整,R所发射的荧光能量被Q基团吸收 ,无荧光, R与Q分开,发荧光(4)Taq酶有 5′→3′外切核酸酶活性,可水解探针。

定量的标准样品

(1)含有和待测样品相同扩增片段的克隆质粒

(2)含有和待测样品相同扩增片段的cDNA

(3)PCR的产物,可分别做系列稀释。

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