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荧光定量PCR技术

荧光定量PCR技术

简要描述:

荧光定量PCR技术于1996年由美国Applied Biosystems公司推出,由于该技术不仅实现了PCR从定性到定量的飞跃,而且与常规PCR相比,它具有特异性更强、有效解决PCR污染问题、自动化程度高等特点,目前已得到广泛应用

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更新时间:2018-07-28

荧光定量PCR技术TaqMan探针的特性:

(1)5′端标记有报告基团(Reporter, R),如FAM、VIC等 

(2)3′端标记有荧光淬灭基团 (Quencher, Q)

(3)探针完整,R所发射的荧光能量被Q基团吸收 ,无荧光, R与Q分开,发荧光(4)Taq酶有 5′→3′外切核酸酶活性,可水解探针。

荧光定量PCR技术定量的标准样品

(1)含有和待测样品相同扩增片段的克隆质粒

(2)含有和待测样品相同扩增片段的cDNA

(3)PCR的产物,可分别做系列稀释。

服务流程:

步骤

客 户 提 供

服 务 内 容

基 屹 提 供

1

新鲜的且尽量多的材料;已知的全长基因序列;尽可能详细的背景资料:DNA/ RNA来源、丰度等。

DNA/RNA提取,根据基因序列设计特异性的引物和荧光探针。

 

2

纯化好的DNA/RNA(大于5 ug/样品);已知的全长基因序列;尽可能详细的背景资料:DNA/ RNA来源、丰度等。

根据基因序列设计特异性的引物和荧光探针。

 

3

 

以DNA为模板,对目的基因进行荧光定量PCR检测分析

提供完整的定量分析结果、实验荧光定量扩增曲线及详细的实验步骤。

注意:客户可根据所能提供的起始材料不同,选择从步骤1或2启动项目。

 

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